Устав определяет порядок церковных служб и регламентирует употребление богослужебных книг. Иерусалимский устав, созданный в VI в. в лавре Саввы Освященного близ Иерусалима и претерпевший несколько редакций на византийской и южнославянской почве, распространился на Руси во второй половине XIV в. Устав состоит из двух основных частей: общей части, предваряемой оглавлением (л. 1) и наставлением игумену о соблюдении устава (л. 2), и месяцеслова (устава церковной службы по месяцеслову) (л. 5). Далее следуют дополнительные статьи к общей части Устава (л. 245). В месяцеслове упоминаются русские памяти: Михаила и Феодора Черниговских, Сергия Радонежского, Варлаама Хутынского, Знамения от иконы Богородицы в Новгороде, митрополитов Московских Петра, Алексея, Ионы, Дмитрия Прилуцкого, князей Владимира, Бориса и Глеба, Антония Печерского, Леонтия и Игнатия Ростовских, Кирилла Белозерского. Кроме того, на полях рукописи имеются позднейшие приписки памятей Иоанна Новгородского, Савватия и Зосимы Соловецких, Никона Радонежского, Александра Невского, Макария Калязинского, Михаила Клопского, Пафнутия Боровского, Дионисия Глушицкого, Павла Комельского. Это важное свидетельство формирования русского пантеона святых.

В книге содержится запись (л. 440 об. — 441), сообщающая, что рукопись создана по заказу священноинока Досифея во время правления Ивана III Васильевича, при архиепископе Новгородском Геннадии. Слова «Священноинока Досифея» вписаны в круг, образованный первой буквой «С», — это первый русский экслибрис. Далее в форме повествования от имени Досифея говорится о том, что эта книга послана им в Соловецкий Спасо-Преображенский монастырь. Упоминаются еще 24 книги, предназначенные для Соловецкого монастыря, причем 17 из них уже перечислялись в аналогичной записи в досифеевской Кормчей 1493 г. (Сол. 863/968), а четыре книги еще только заказаны. В конце записи указана дата — 1494 г.